摘要:【目的】由果生炭疽菌引起的炭疽病是油茶的主要病害,造成油茶產(chǎn)量下降。本文研究果生炭疽菌中絲裂原活化蛋白激酶CfMkk1的生物學(xué)功能,旨在為解析油茶炭疽病菌的致病機(jī)理提供依據(jù)。【方法】根據(jù)同源重組原理構(gòu)建CfMKK1基因敲除載體片段,采用PEG介導(dǎo)法將載體導(dǎo)入原生質(zhì)體中篩選獲得突變體菌株ΔCfmkk1;PCR擴(kuò)增果生炭疽菌含有啟動(dòng)子的CfMKK1基因回補(bǔ)片段,構(gòu)建回補(bǔ)載體 pYF11:: CfMKK1;采用PEG介導(dǎo)法把回補(bǔ)載體轉(zhuǎn)化至突變體的原生質(zhì)體中,熒光篩選回補(bǔ)菌株ΔCfmkk1-C。測(cè)定野生型菌株、突變體菌株ΔCfmkk1及基因回補(bǔ)菌株ΔCfmkk1-C在營養(yǎng)生長、附著胞形成、脅迫應(yīng)答和致病力等生物學(xué)表型?!窘Y(jié)果】與野生型和回補(bǔ)菌株相比,CfMKK1基因敲除突變體ΔCfmkk1菌絲生長速率明顯減緩;在含剛果紅的PDA培養(yǎng)基上菌絲生長受到明顯抑制,無法穿透玻璃紙,喪失了侵染寄主的能力;而且無法形成附著胞?!窘Y(jié)論】研究結(jié)果表明CfMKK1基因參與調(diào)控油茶果生炭疽菌的生長發(fā)育、附著胞形成、致病力以及響應(yīng)外界脅迫過程。
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